Разлика между поточна цитометрия и FACS

Основна разлика - Flow Cytometry срещу FACS

В контекста на клетъчната теория клетките са основната структурна и функционална единица на всички живи организми. Клетъчното сортиране е методология, която се използва за разделяне на различни клетки според физиологичните и морфологичните особености. Те могат да имат вътреклетъчни или извънклетъчни характеристики. Взаимодействието на ДНК, РНК и протеини се счита за вътреклетъчни интерактивни свойства, докато формата, размера и различните повърхностни протеини се считат за извънклетъчни свойства. В съвременната наука методологиите за сортиране на клетки доведоха до подпомагане на различните изследвания в биологичните проучвания, а също и до установяването на нови принципи чрез изследвания на медицината. Клетъчното сортиране се провежда по различни методологии, които включват както примитивни с по-малко оборудване, така и усъвършенствани технологични методологии с използването на сложни машини. Проточна цитометрия, сортиране на флуоресцентни клетки (FACS), селекцията на магнитни клетки и сортирането на единични клетки са основните използвани методи. Проточната цитометрия и FACS са разработени за диференциране на клетките според техните оптични свойства. FACS е специализиран вид проточна цитометрия. Проточната цитометрия е методология, която се използва при анализ на хетерогенна популация на клетки според различни молекули на клетъчната повърхност, размер и обем, която позволява изследване на единични клетки. FACS е процес, при който пробна смес от клетки се сортира според техните характеристики на разсейване на светлина и флуоресценция в два или повече контейнера. Това е ключова разлика между проточна цитометрия и FACS.

СЪДЪРЖАНИЕ

1. Преглед и ключова разлика
2. Какво е поточна цитометрия
3. Какво е FACS
4. Прилики между цитометрията на потока и FACS
5. Паралелно сравнение - поточна цитометрия срещу FACS в таблична форма
6. Резюме

Какво е поточна цитометрия?

Проточната цитометрия е метод, който се използва за изследване и определяне на експресията на вътреклетъчните молекули и клетъчната повърхност и за определяне и характеризиране на отделни типове клетки. Той се използва също за определяне на клетъчния обем и размера на клетките и за оценка на чистотата на субпопулациите, които са изолирани. Това позволява многопараметричната оценка на единични клетки приблизително по едно и също време. Проточната цитометрия се използва за измерване на интензивността на флуоресценцията, която се получава благодарение на флуоресцентно белязани антитела, които помагат да се идентифицират протеини или лиганди, които се свързват към свързани клетки.

Фигура 01: Проточна цитометрия

По принцип проточната цитометрия включва главно три подсистеми. Те са флуидиците, електрониката и оптиката. В проточната цитометрия са на разположение пет основни компонента, които се използват при клетъчното сортиране. Те са поточна клетка (поток от течност, която се използва за транспортирането им и подравняване на клетките за оптичен сензор), система за измерване (може да бъде от различни системи, включително живачни и ксенонови лампи, водно охлаждане с висока мощност или лазери с въздушно охлаждане с ниска мощност или диодни лазери), ADC; Система за аналогови и цифрови преобразуватели, усилвателна система и компютър за анализ. Придобиването е процесът, чрез който данните се събират от пробите с помощта на проточен цитометър. Този процес се медиира от компютър, който е свързан с проточния цитометър. Софтуерът, присъстващ в компютъра, анализира информацията, подадена на компютъра от поточния цитометър. Софтуерът също има възможност за настройка на параметрите на експеримента, контролиращ поточния цитометър.

Какво е FACS?

В контекста на поточната цитометрия, Сравняване на флуоресценция на клетките (FACS) е метод, който се използва при диференциране и сортиране на проба от смес от биологични клетки. Клетките са разделени от два или повече контейнера. Методът за сортиране се основава на физическите характеристики на клетката, която включва характеристики на разсейване на светлината и флуоресценция на клетката. Това е важна научна техника, която може да се използва за получаване на надеждни количествени и качествени резултати от флуоресцентни сигнали, които се излъчват от всяка клетка. По време на FACS, първоначално предварително получената смес от клетки; суспензията се насочва към центъра на тесен поток от течност, който тече бързо. Потокът на течността е проектиран така, че да разделя клетките в суспензията въз основа на диаметъра на всяка клетка. Върху суспензионния поток се прилага механизъм на вибрация, което води до образуването на отделни капчици.

Фигура 02: FACS

Системата е калибрирана, за да създаде една капка с една клетка. Точно преди образуването на капчици, поточната суспензия се движи по апарата за измерване на флуоресценция, който открива характеристиката на флуоресценцията за всяка клетка. В точката на образуване на капчици се поставя електрически зареждащ пръстен, който зарядът се индуцира към пръстена преди измерването на интензивността на флуоресценцията. След като капчиците се образуват от потока на суспензията, в капчиците се захваща заряд, който след това влиза в електростатична отклоняваща система. Според заряда системата отклонява капчиците в различни контейнери. Методът за прилагане на заряда варира в зависимост от различните системи, използвани в FACS. Оборудването, използвано в FACS, е известно като сортиране на флуоресцентни клетки.

Какво е сходството между Flow Cytometry и FACS?

• Проточната цитометрия и FACS са разработени за диференциране на клетките според техните оптични свойства.

Каква е разликата между поточната цитометрия и FACS?

Проточна цитометрия срещу FACS
Проточната цитометрия е методология, която се използва при анализ на хетерогенна популация на клетки според различни молекули на клетъчната повърхност, размер и обем, която позволява изследване на единични клетки.	FACS е процес, при който пробна смес от клетки се сортира според техните характеристики на разсейване на светлина и флуоресценция в два или повече контейнера.

Обобщение - поток Цитометрия срещу FACS

Клетката е основната структурна и функционална единица на всички живи организми. Клетъчното сортиране е процесът, при който клетките се изолират и диференцират в различни категории въз основа на техните вътреклетъчни и извънклетъчни свойства. Проточната цитометрия и FACS са две важни методологии при клетъчното сортиране. И двата процеса са разработени за диференциране на клетките според техните оптични свойства. Проточната цитометрия е методология, която се използва по време на анализ на хетерогенна популация на клетки според различни молекули на клетъчната повърхност, размер и обем, която позволява изследване на единични клетки. FACS е процес, при който пробна смес от клетки се сортира според техните характеристики на разсейване на светлина и флуоресценция в два или повече контейнера. Това е разликата между Flow Cytometry и FACS.

Изтеглете PDF версията на Flow Cytometry срещу FACS

Можете да изтеглите PDF версия на тази статия и да я използвате за офлайн цели, съгласно цитираната бележка. Моля, изтеглете PDF версия тук Разлика между Flow Cytometry и FACS

справка:

1. Проточна цитометрия (FCM) / FACS | Сравняване на флуоресценция на клетките (FACS). Достъпно 22 септември 2017. Достъпно тук
2. Ибрахим, Шериф Ф. и Гер ван ден Енг. "Проточна цитометрия и клетъчно сортиране." SpringerLink, Springer, Берлин, Хайделберг, 1 януари 1970 г. ... Достъпно 22 септември 2017 г. Достъпно тук

С любезност на изображенията:

1. „Цитометър“ от Киерано - Собствена работа, (CC BY 3.0) през Wikimedia на Commons
2. „Флуоресцентно клетъчно сортиране (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Разработване на ин витро моделна система за изследване на взаимодействието на Equus caballus IgE с неговия високоафинитетен FcεRI рецептор (докторска дисертация), Университета в Шефилд , (CC BY-SA 3.0) през Wikimedia на Commons