В контекста на микроскопията оцветяването се счита за съществена стъпка по време на засилване на контраста на микроскопичното изображение, особено за подчертаване на различни структури в биологичните тъкани. По време на оцветяването на петна от периферна кръв и костен мозък се използват петна от Райт и Гемса. Тези петна са известни като Романовски петна. И двете тези петна са съставени от важни компоненти: окислено метиленово синьо, багрила с еозин Y и лазурно B. Функцията на метиленово синьото и лазурното B е да оцветят ядрото с цветове, вариращи от синьо до лилаво. Тези петна са широко използвани по време на изследването на морфологията на червените кръвни клетки и по време на извършването на различен брой бели кръвни клетки. Диагнозата на различни болестни състояния като левкемия може да бъде постигната чрез процедури за оцветяване на Romanowsky. Оцветяването с Райт се използва за диференциране на кръвни клетки, които се състоят от смес от еозин и метиленово сини багрила. Оцветяването с Giemsa се използва по време на оцветяването на бактериални клетки, както и на човешки клетки и може да се комбинира с петно на Райт, за да се получи петно от Giemsa Wright. Това е ключовата разлика между петна от Giemsa и петна на Райт.
Петното от Giemsa се използва за цитогенетика и хистопатологична диагностика на паразити от малария и други паразитни заболявания. Петното от Giemsa също може да се счита за основно петно при класифицирането на лимфомите в класификацията на Кил. Петната от Giemsa са необходими за лента Giemsa, която е известна като G-лента. Гимса лента се използва за оцветяване на хромозоми и също така се използва за създаване на кариограми. Хромозомните аномалии като транслокации и пренареждания се идентифицират чрез обвързване на Giemsa. Петното от Giemsa се използва в хистологията поради висококачественото си оцветяване на ядрената мембрана и хроматин, метахромазията на някои клетъчни компоненти и различните качества на цитоплазменото оцветяване на базата на клетъчния тип.
Фигура 01: Петно Giemsa
Разтворът на Giemsa съдържа метиленово синьо, Azure B и еозин и петното се приготвя търговски с използването на Giemsa прах. Стабилността на петното зависи от метиленовия лазур и неговата смес заедно с метиленово синьо, което образува еозинат. Петното от Giemsa е специфично за фосфатните групи в нишката на ДНК и се прикрепя към зоните, където има голямо количество аденин-тиминови връзки. При метода за оцветяване на Giemsa тънък слой от пробата се поставя първоначално върху микроскопична стъкла заедно с няколко капки чист метанол за около 30 секунди. След това слайдът се потапя в 5% разтвор на петна Giemsa, който се приготвя прясно, за около 20 - 30 минути. Накрая пързалката се измива с чешмяна вода и се оставя да изсъхне. Петното от Giemsa е известно като диференциално петно, защото петното на Райт-Giemsa се образува, когато петното на Райт се комбинира с Giemsa. Следователно, той може да се използва при изследване на патогенни бактерии, свързани с човешки клетки. Тук човешките клетки и бактериалните клетки са оцветени по дефиниция и съответно се наблюдават пурпурни и розови цветове.
Петното на Райт е кръстено на Джеймс Омир Райт, който е променил петното на Романовски. Петното на Райт се използва за разграничаване на типовете кръвни клетки, тъй като помага да се прави разлика между типове кръвни клетки. В резултат на това инфекциите могат да бъдат диагностицирани чрез наблюдение на броя на белите кръвни клетки. Петното е смес от еозин, който е с червен цвят, и метиленово сини багрила. Петното на Райт се използва за оцветяване и наблюдение на проби от урина, петна от периферна кръв и аспирати от костен мозък под леки микроскопи. Петното на Райт се използва за оцветяване на хромозоми в цитогенетиката за насърчаване на диагнозата на няколко заболявания и синдроми. Пробите от урина, които са оцветени с петно на Райт, идентифицират еозинофилите, показващи инфекция на уринарния тракт.
Фигура 02: Райт петно
В процеса на оцветяване на Райт се приготвя въздушно изсушен кръвен филм и се нанася Райт петно и се оставя за 3 минути. След това се добавя буферът с равно количество петно, разбърква се внимателно и се оставя за 5 минути. Острието се държи хоризонтално и се измива добре с неутрална дестилирана вода. И накрая, той се изсушава и наблюдава под микроскоп.
Giemsa Stain срещу Wright Stain | |
Петното от Giemsa е диференцирана техника за оцветяване, използвана предимно за оцветяване на бактериални клетки, а също и на човешки клетки. | Петното по Райт е диференцирана техника за оцветяване, използвана главно при процедурите за оцветяване на кръвни мазки, проби от урина и аспирати от костен мозък. |
Оцветяването е основна лабораторна техника, която се използва по време на микроскопия, която се използва за подобряване на контраста на микроскопичното изображение. Петната от Giemsa и Wright Stain, известни като Романовски петна, участват в извършването на различен брой бели кръвни клетки и изследване на клетъчната морфология на червените кръвни клетки. Окислените метиленово сини, еозиновите Y и лазурните B багрила са важните компоненти на петна от Романовски. Основно, петно от Giemsa се използва по време на оцветяване на бактериални клетки, но може да се използва и за човешки клетки. Оцветяването по Райт се използва широко по време на оцветяване на кръвни мазки, проби от урина и аспирати от костен мозък. Това е разликата между петното от Giesma и петното на Райт.
Можете да изтеглите PDF версия на тази статия и да я използвате за офлайн цели, съгласно цитираната бележка. Моля, изтеглете PDF версия тук Разлика между Giemsa Stain и Wright Stain
1. Barcia, J. J. „Петното от Giemsa: нейната история и приложения.“ Международно списание за хирургическа патология., Национална медицинска библиотека на САЩ, юли 2007 г., достъпно тук. Достъп до 12 септември 2017 г.
2. Крафтс, K P и S E Pambuccian. „Оцветяване на Романовски в цитопатологията: история, предимства и ограничения.“ Биотехника и хистохимия: официална публикация на Комисията за биологични петна., Национална медицинска библиотека в САЩ, април 2011 г., достъпна тук. Достъп до 12 септември 2017 г.
1. "Трипаносома-еванси-плъх-кръв-Гемса-петно" от Алън Р Уокър - Собствена работа (CC BY-SA 3.0) през Commons Wikimedia
2. „Мачтова клетка, аспират от костен мозък, Райт Петно (5916735712)“ от Ед Утман от Хюстън, Тексас, САЩ - Мачтова клетка, Аспирация на костен мозък, Райт Замъкнати от CFCF (CC BY 2.0) през Commons Wikimedia