Бактериите са много малки микроорганизми. Те са прозрачни и тяхното откриване е трудно при жизнени и несъхранени условия. По този начин са разработени различни методи за оцветяване, за да се улесни откриването на бактерии. Има три основни типа техники за оцветяване: просто оцветяване, диференциално оцветяване и структурно оцветяване. Диференциалното оцветяване е техника, която използва повече от едно петно за диференциране на бактерии. Петната по грам и петна от киселини са най-популярни като диференциални петна. Оцветяването по грам е диференцирана техника за оцветяване, която разделя бактериите на две групи, известни като Грам-положителни бактерии и Грам-отрицателни бактерии. Киселинно бързото петно е диференциално петно, използвано за идентифициране на бързо киселинни организми, като Mycobacterium от некисели бързи организми. Това е ключовата разлика между оцветяването по Gram и Acid Fast.
1. Преглед и ключова разлика
2. Какво е грам петно
3. Какво е киселинно бързо
4. Прилики между петна по грам и бързи киселини
5. Паралелно сравнение - грам петно срещу киселина бързо в таблична форма
6. Резюме
Оцветяването по грам е важна техника за диференциално оцветяване, използвана за идентифициране на бактерии в микробиологията. Тази техника е въведена от датския бактериолог Ханс Кристиан Грам през 1884 г. Оцветяването по грам категоризира бактериите в две основни групи, наречени грам положителни и грам отрицателни, които са много важни за бактериалната класификация и идентификация. Микробиолозите извършват оцветяване с грам като начална стъпка в бактериалната характеристика по време на проучванията си.
Бактериите се групират въз основа на разликите в тяхната клетъчна стена. Грамположителните бактерии се състоят от плътен пептидогликанов слой в клетъчната им стена, докато грам отрицателните бактерии са съставени от тънък пептидогликанов слой в тяхната клетъчна стена. Резултатът от оцветяването с грам ще се основава на разликата в дебелината на пептидогликановия слой на клетъчната стена.
Оцветяването по грамове се извършва с помощта на четири различни реагента, а именно; първично петно, морда, обезцветяващо средство и противоцветно петно. Кристалният виолетов и сафранин се използват като първични и противоположни петна, съответно като грам йод и 95% алкохол се използват съответно като мордант и обезцветител. Основните стъпки на грам петна са както следва;
В края на грам оцветяването ще се наблюдават грам отрицателни бактерии в розов цвят, докато грам положителните бактерии ще се наблюдават в лилав цвят.
Фигура 01: Грам отрицателни и грамположителни бактерии
Резултатът от грамовото петно се определя от дебелината на пептидогликановия слой в тяхната клетъчна стена. По време на стъпката на обезцветяване първичното оцветяване и мордитът лесно се отстраняват от грам отрицателните бактерии и стават безцветни, тъй като имат тънък пептидогликанов слой. Първичното петно се задържа в грам положителните бактерии, тъй като имат плътен пептидогликанов слой. Противоположното петно няма да бъде ефективно за грамположителните бактерии поради задържането на първичното петно. По този начин грам положителни бактерии ще бъдат видими в първичен цвят на петна, тоест лилав цвят. Противоположното петно ще оцвети грам отрицателните бактерии и те ще бъдат видими в цвят на подбор, който е цветът на сафранина. Следователно е лесно да се категоризират бактериите в две групи по грам петна и това е ценно при бактериалната диференциация и идентификация.
Киселинната устойчивост е физическо свойство на някои бактерии, по-специално тяхната устойчивост на обезцветяване от киселини по време на процедурите за оцветяване. Веднъж оцветени, тези организми издържат на процедури на обезцветяване на базата на разредена киселина и / или етанол, често срещани в много протоколи за оцветяване. По този начин наименованието „киселинно бързо“ се дава на тези организми. Това свойство е показано поради наличието на високо ниво на восъчен материал (миколови киселини) в клетъчните им стени. Този тест е критичен за идентифицирането на Mycobacterium tuberculosis.
Фигура 2: Микробактерии с бързи киселини
Това киселинно бързо петно е разработено от Пол Ерлих през 1882 г. Техниката за бърза киселина на Ерлих е модифицирана от Ziehl-Neelsen и сега се използва по-често. Процедурата за бързо оцветяване с киселини включва три различни реагента. Carbol fuschin се използва като основно петно. Киселият алкохол се използва като обезцветяващо средство. Като противоположно петно се използва метиленово синьо. Процедурата за оцветяване се извършва по следния начин.
Gram петно срещу киселина бързо | |
Оцветяването по Грам е диференцирана техника за оцветяване, която разделя бактериите на две групи Грам-положителни бактерии и Грам-отрицателни бактерии. | Acid Fast петното е диференциално петно, използвано за идентифициране на бързо киселинни организми от некисели бързи организми. |
Първично петно | |
Кристалната виолетка е често използваното първично петно при грам оцветяване. | Carbol fuchsin е основното петно, използвано в киселината бързо. |
Обезцветяващ агент | |
95% алкохол се използва като обезцветяващо средство в грам петна. | Киселият алкохол се използва като обезцветяващо средство в киселините бързо. |
Counter петно | |
Оцветяването по грам използва сафранин като контра петно. | Киселото бързо оцветяване използва метиленово синьо като противоположно петно. |
наблюдение | |
Грам отрицателните бактерии се наблюдават в цвят на подбор, а грам положителните бактерии се наблюдават в лилав цвят. | Киселина Бързите бактерии се наблюдават в червен цвят, а некиселите бързи бактерии се наблюдават в син цвят. |
Визуализацията на микроорганизмите в живо състояние е трудна. Следователно, биологични петна и процедури за оцветяване се използват широко за изследване на техните свойства. Диференциалното оцветяване е един вид техника на оцветяване, използвана за диференциране на бактерии. Оцветяването по грам и бързо оцветяване са две различни техники за оцветяване. Оцветяването по грам диференцира грам отрицателни бактерии и грам положителни бактерии въз основа на дебелината на техните клетъчни стени. Киселинното бързо оцветяване отличава киселинно бързите бактерии от некиселите бързи бактерии въз основа на съдържанието на миколова киселина в клетъчната стена. Това е разликата между киселинното бързо и грам петна.
Можете да изтеглите PDF версия на тази статия и да я използвате за офлайн цели, съгласно цитираната бележка. Моля, изтеглете PDF версия тук Разлика между грам петно и киселинно бързо.
1. Aryal, Sagar. „Киселинно-бързо оцветяване - принцип, процедура, тълкуване и примери.“ Бележки за микробиология онлайн. N.p., 08 май 2017. Web. Налични тук 20 юли 2017 г..
2. Диференциални петна за идентифициране на бактерии: грам, киселинно-бързи и ендоспори. N.p., n.d. Web. Налични тук 20 юли 2017 г..
1. „Лимфен възел - Атипична микобактериална инфекция (MAI) - Пятно AFB“ от Yala Rosen (CC BY-SA 2.0) чрез Flickr
2. "Gram петно 01" от Y tambe - Y файл на tambe (CC BY-SA 3.0) през Commons Wikimedia