Нека първо разгледаме значението на HPLC и LCMS, преди да анализираме разликата между HPLC и LCMS. Хроматографията е техника на отделяне в химичния анализ, при която съставките на пробата се разделят по време на преминаване през хроматографска среда. Той също така включва взаимодействие с пробата, стационарна фаза и подвижна фаза. HPLC означава Високоефективна Течна хроматография, и се използва като метод на течна хроматография в аналитичната химия. Комбинацията от Течна хроматография и масова спектроскопия (LCMS) е разработен за количествения анализ на избрани биомолекули и това е така високо чувствителна, точна и специфична процедура за анализ в сравнение с HPLC. Това е ключова разлика между HPLC и LCMC. Тази статия ще ви запознае с HPLC и LCMC, които се занимават с химичен анализ и ще обсъдят разликите между HPLC и LCMS.
Високоефективната течна хроматография (HPLC) е популярна сепарационна техника в аналитичната химия. Основно е използва се за разделяне на компонентите, за идентифициране и количествено определяне на всеки компонент в смес. По-рано този метод беше известен като течна хроматография с високо налягане тъй като това зависи от помпите, за да тече течен разтворител под налягане, съдържащ сместа от пробата през колона, пълна с твърд адсорбентен материал. Всеки компонент в сместа за проба взаимодейства по различен начин с твърдия адсорбиращ материал, което води до различни дебити на различните съставки. Това може да доведе до разделяне на съставките, когато те изтичат HPLC колоната.
HPLC се използва за различни приложения като анализ на нивата на витамин D в кръвта, незаконно използване на наркотици на спортисти чрез откриване на остатъците от лекарството в урината им, сортиране на съставките на сложна биологична проба за изследователски цели и анализ и производство на фармацевтични продукти.
Течната хроматография-мас-спектрометрия (LCMS) е аналитична техника, която съчетава физическите способности за разделяне на течната хроматография със способностите за анализ на масата на мас-спектрометрията (MS). Течната хроматография е техника на разделяне и мас-спектрометрията се използва за анализ на съотношението маса към заряд на заредените частици. Физическото разделяне обикновено се постига чрез HPLC и алтернативно, LCMS също известен като HPLC-MS. LCMS е a доминираща аналитична техника който има a много висока точност, чувствителност и специфичност в сравнение с HPLC. По този начин е полезно в много приложения като изследователски цели, анализ на лекарства, анализ на храни и др. Основно е LCMS използва се за отделяне, откриване, идентифициране и количествено определяне на биохимичните свойства на определена проба в присъствието на сложни химически смеси.
HPLC: HPLC означава високоефективна течна хроматография. Това е техника на отделяне, която се използва главно за разделяне на компонентите, за идентифициране и количествено определяне на всеки компонент в смес.
LCMS: LCMS означаваТечна хроматография и масова спектрометрия. Това е аналитична техника, която съчетава способностите за физическо разделяне на течната хроматография със способностите за анализ на масата на масспектрометрията (MS).
HPLC: Това е само метод на течна хроматография.
LCMS: Това е комбинация от метод на течна хроматография и метод на мас-спектрометрия.
HPLC: В сравнение с LCMS, HPLC анализът е по-малко ефективен и по-бавен.
LCMS: В сравнение с HPLC, LCMS анализът е ефективен и по-бърз.
HPLC: В сравнение с LCMS, HPLC анализът е по-малко чувствителен.
LCMS: В сравнение с HPLC, LCMS анализът е по-чувствителен.
HPLC: В сравнение с LCMS, HPLC анализът е по-малко специфичен.
LCMS: В сравнение с HPLC, LCMS анализът е по-специфичен.
HPLC: HPLC дава по-малко точни резултати от LCMS за определяне на някои химикали.
LCMS: LCMS дава по-точни резултати от HPLC за определяне на някои химикали.
HPLC: HPLC може да се разглежда като компонент на LCMS.
LCMS: LCMS не може да се разглежда като компонент на HPLC.
HPLC: Източник на йони не съществува в HPLC инструмента.
LCMS: Източникът на йони присъства в LCMS инструмента.
HPLC: Йони, полимери, органични молекули и биомолекули могат да бъдат анализирани с помощта на HPLC.
LCMS: Органичните молекули и биомолекулите могат да бъдат анализирани. За разлика от HPLC, LCMS може да се използва за изследване на напълно разтворени смеси.
HPLC: Диаграмата на HPLC инструмент е дадена на фигура 1 и обикновено включва автопробоотборник, помпи и детектор. Пробоотборникът въвежда пробата от сместа в подвижната фаза (смес под налягане от разтворители като вода, ацетонитрил и / или метанол), която я пренася в колоната. Помпите доставят желания поток и състав на подвижната фаза през колоната. Колоната се пълни с адсорбент, който е зърнеста твърда частица като силициев диоксид или полимери. Детекторът произвежда сигнал, пропорционален на количеството присъствие на съставката на пробата в колоната, следователно позволява количествено измерим анализ на избраните съставки на пробата. HPLC инструментът се контролира и анализът на данните се осигурява от цифров микропроцесор и потребителски софтуер.
Фигура 1: Диаграма на HPLC инструмент
LCMS: Диаграмата на LCMS инструмента е дадена на фигура 2. Екстрактът от пробата се поставя в колоната, състояща се от HPLC. Тази колона запазва пробите от метаболити на базата на физически знаци и различни метаболити преминават към масовия спектрометър през различни интервали от време. Масова спектроскопия се използва за оценка на масивите от частици, за определяне на елементарното разположение на молекулата и за изясняване на молекулните структури. Пробата обаче трябва да се йонизира, за да генерира заредени молекули, за да се определи тяхното съотношение маса към заряд. Следователно, вместо HPLC инструменти, LCMS се състои от допълнителни три модула като източник на желязо, мас анализатор и детектор. Източникът на йони може да преобразува пробата от газова фаза в йони и анализатор на маса, групирайки йони по техните маси, използвайки електромагнитни полета. И накрая, детектор количествено определя стойностите и предоставя данни за всеки йон, присъстващ в пробата. LCMS техниката може да се използва както за качествени, така и за количествени приложения.
Фигура 2: Диаграма на LCMS инструмент
В заключение, HPLC е метод за течна хроматография, докато LCMS е комбинация от течна хроматография и мас-спектрометрия. И двете техники за анализ имат различни характеристики, но те могат да бъдат използвани за идентифициране и количествено определяне на хранителни състави, фармацевтични продукти и други биоактивни молекули.
Позовавания Арпино, П. (1992). Масова спектрометрия на комбинирана течна хроматография. Част III. Приложения на термоспрей. Прегледи за масова спектрометрия, 11: 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. и Spoendlin, C. (2004). Практически аспекти на бърза високоефективна течна хроматография с обърната фаза, използваща 3 μm колони с частици и монолитни колони във фармацевтичната разработка и производство, работещи при съвременните добри производствени практики. Списание за хроматография, 1036 (2): 127-133. Lee, M. S. и Kerns, E. H. (1999). LC / MS приложения в разработването на лекарства. Прегледи за масова спектрометрия, 18 (3-4): 187-279. Мъри, К. К. (1997). Свързване на матрична асистирана лазерна десорбция / йонизация с течни разделяния. Прегледи за масова спектрометрия 16 (5): 283. С любезното изображение: „Hplc“ от оригиналния качител беше Kjaergaard в en.wikipedia - Прехвърлен от en.wikipedia. (Public Domain) чрез Commons