Разлика между хибридизация в ситу и имунохистохимия

Ключова разлика - хибридизация в ситуацията срещу имунохистохимия
 

Диагностиката на рака и инфекциозните заболявания е популярна тенденция, при която се използват нови техники, базирани на протеомика и геномика, с цел идентифициране на тумори или инфекциозни клетки, неговото разпространение и местата на развитие на клетките и анализ на генетичната основа на повечето заразни и незаразни заболявания. Това ще доведе до прецизна обработка и проектиране на лекарства и до разработване на персонализирани терапии за заболявания. Хибридизацията in situ (ISH) и имунохистохимията (IHC) са две такива широко използвани техники в биологията на рака и ключовата разлика между хибридизацията in situ и имунохимията се състои в молекулите, които се използват в процедурата за анализ. В ISH сондите на нуклеиновата киселина се използват в анализа, докато при IHC се използват моноклонални и поликлонални антитела за диагностични определяния.

СЪДЪРЖАНИЕ

1. Преглед и ключова разлика
2. Какво е хибридизация в ситу
3. Какво е имунохистохимия
4. Прилики между хибридизацията в ситу и имунохистохимията
5. Паралелно сравнение - при хибридизация на ситума срещу имунохистохимия в таблична форма
6. Резюме

Какво е хибридизация в ситу (ISH)?

Хибридизацията in situ е техника на хибридизация на нуклеинова киселина, която се извършва директно върху част или част от тъкан, в цялата тъкан или в клетките. Техниката зависи от теорията на допълващото базово сдвояване на Уотсън Крик, което води до или ДНК-ДНК хибриди, или ДНК-РНК хибриди, които могат да открият мутирали гени или да идентифицират необходимия интерес от гена. Едноверижни ДНК последователности, двуверижни ДНК последователности, едноверижни РНК секвенции или синтетични олигонуклеотидни последователности се използват като сонди по време на техниката на хибридизация, като тези сонди са белязани с радиоактивен фосфор в своя 5 'край за процедури за идентификация при авторадиография или белязани с помощта на флуоресцентни багрила , Съществуват различни видове техники ISH, базирани на вида на използваната сонда и последващия вид визуализираща техника.

Фигура 01: Флуоресцентна хибридизация в ситу

Има много приложения на ISH, главно в молекулярната диагностика на инфекциозни заболявания, за да се идентифицира наличието на патогени и да се потвърди патогенът чрез молекулярна диагностика. Използва се и в областта на биологията на развитието, кариотипирането и филогенетичния анализ и физическото картографиране на хромозомите.

Какво е имунохистохимия (IHC)?

В техниката на IHC основната анализирана молекула е антигенът. По време на IHC се използват моноклонални и поликлонални антитела, за да се определи наличието на антигени при инфекция или статус на злокачествена клетъчна пролиферация. Техниката се основава на свързване на антиген-антитела и за тази техника се използват етикетни етикети; едно такова приложение е ELISA (Ензимно свързан имуносорбентен анализ). Маркерите могат също да бъдат флуоресцентни антитела или радиомаркирани антитела.

Фигура 02: Имунохистохимия

IHC се използва широко за откриване на ракови клетки. Диагностичните процедури са насочени към антигените, присъстващи на туморните клетки, за да идентифицират и характеризират тумора. Същата процедура е включена за диагностициране на инфекциозни агенти. Моноклонални и поликлонални антитела също се използват за анализ на различни генни продукти, като позволяват реакцията на свързване антитяло-антиген между желания протеин и администрираното синтетично антитяло.

Какви са приликите между хибридизацията в ситу и имунохистохимията?

• ISH и IHC са силно специфични реакции.
• И двете техники са високо точни.
• И двете техники могат да бъдат използвани в диагностиката на ракови и инфекциозни заболявания.
• Тези техники се извършват в стерилна in vitro среда.
• И двете са бързи техники, които осигуряват възпроизводими резултати.
• ISH и IHC използват методи за откриване като радио етикетиране и флуоресцентни техники.

Каква е разликата между хибридизацията в ситу и имунохистохимията?

В ситу хибридизация срещу имунохистохимия
ISH е техника на хибридизация на нуклеинова киселина, която се извършва директно върху част или част от тъкан или цялата тъкан.	IHC е техника, при която се използват моноклонални и поликлонални антитела за определяне наличието на антигени, които са специални протеинови маркери, поставени върху клетъчните повърхности.
Вид на анализираните биомолекули
ISH анализира нуклеиновите киселини.	IHC анализира протеини-антигени.
Основа на биохимичната реакция
При тази техника възниква комплексно свързване на база между ДНК-ДНК или ДНК-РНК.	Взаимодействията антиген-антитяло участват в имунохистохимията.
Ензимно свързани методи за откриване
Ензимните методи за откриване не могат да се използват в ISH.	Ензимните методи за откриване могат да се използват в IHC.

Обобщение - хибридизация в ситу срещу vs имунохистохимия

Молекулярната диагностика е бързи и потвърждаващи методи, които могат да бъдат използвани за идентифициране на незаразно заболяване като рак или заразно заболяване като ХИВ или туберкулоза на базата на молекулярните маркери, присъстващи в клетките, които водят до проявата на болестта. Молекулярните маркери могат да присъстват под формата на експресирани протеини или на генетично ниво, въз основа на които се въвеждат различни нови техники за повишаване на ефективността и са по-малко трудоемки, въпреки че има висока цена, свързана с тези техники. По този начин ISH зависи от хибридното образуване на DNA-DNA или DNA-RNA, а IHC зависи от специфичните реакции между антитялото и антигена. Това е разликата между in situ хибридизация.

Изтеглете PDF версия на хибридизацията In Situ срещу имунохистохимията

Можете да изтеглите PDF версия на тази статия и да я използвате за офлайн цели, съгласно цитираната бележка. Моля, изтеглете PDF версия тук Разлика между хибридизацията в ситу и имунохистохимията.

Препратки:

1. Дурайян, Джеяпрада и др. „Приложения на имунохистохимията.“ Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, август 2012 г., достъпен тук. Достъп до 24 август 2017 г..
2. „In Situ Hybridization (ISH).“ Национален център за информация за биотехнологиите, Национална медицинска библиотека на САЩ, достъпен тук. Достъп до 24 август 2017 г..

С любезност на изображенията:

1. „FISH (флуоресцентна хибридизация в ситуи)“ от MrMatze - Собствена работа (CC BY-SA 3.0) през Wikimedia на Commons
2. „Имунохистохимично оцветяване2“ От Imoen от английския език Wikipedia (CC BY-SA 3.0) през Commons Wikimedia