Разлика между Phusion и Taq полимераза
Share
Ключова разлика - Phusion срещу Taq полимеразна
ДНК полимеразите са широко използвани ензими в техниките на молекулярната биология и също естествено присъстват във всички организми, подложени на репликация на ДНК. Те са ключовите полимеризиращи ензими, които участват по време на репликацията. ДНК полимеразата е способна да добави нуклеотиди към свободния 3 'край на ДНК веригата, като по този начин причинява разширението на нова верига. Понастоящем, поради развитието на молекулярната биология в диагностиката на заболяванията и промишленото приложение, е важно да се произвеждат полимерази с различни полезни свойства. Това увеличава точността на метода и го прави по-бърза техника. Phusion и Taq полимераза са два търговски произведени термостабилни ензими от полимераза, които се използват в специални молекулярни приложения. Phusion е ДНК полимераза, изолирана от Pyrococcus furiosus и се използва главно в експерименти с клониране за увеличаване на вярността. Taq ДНК-полимераза е стандартната ДНК-полимераза, използвана в полимеразната верижна реакция (PCR), и е изолирана от термостабилната бактерия; Thermus aquaticus. Най- ключова разлика между двата ензима е микроорганизмът източник. Физията се изолира от екстремофила, Pyrococcus furiosus като има предвид, че Taq полимераза е изолирана от термофила, Thermus aquaticus.
СЪДЪРЖАНИЕ
1. Преглед и ключова разлика
2. Какво е Phusion
3. Какво е Taq полимераза
4. Прилики между Phusion и Taq Polymerase
5. Паралелно сравнение - Phusion срещу Taq полимераза в таблична форма
6. Резюме
Какво е Phusion?
Phusion ДНК полимераза е нова полимераза, която се получава чрез изолиране на ензима от Pyrococcus furiosus, което е екстремофилна Архея. Тези микроби пребивават в изключително високотемпературни условия, което прави полимеразата силно устойчива на топлина полимераза. Физионната полимераза се използва за постигане на изключителна вярност спрямо конвенционалната термостабилна полимераза; Taq полимераза. Физионната полимераза е способна да амплифицира дълги шаблони до 7,5 kb геномна ДНК. Оптималният капацитет на полимеризация на Phusion полимераза е 720 В. Phusion се използва също в продукти за клониране за секвениране, анализ на експресията и мутационен анализ.
Фюзионната ДНК полимераза има 3 '- 5' екзонуклеазна активност. Това позволява корекция на новосинтезираната нишка след синтеза. Следователно, нуклеотидните несъответствия лесно се поправят. Така той има по-малка степен на грешка. Общите предимства на Phusion полимеразата са;
- Изключителна вярност
- Висока скорост и намалено време за удължаване
- Здрави реакции и изисква минимална оптимизация
- Висока доходност
Фигура 01: Физия
Основният недостатък на Phusion полимеразата е, че тя се инхибира в присъствието на дезоксиуридин трифосфат (dUTP). Когато dUTP се натрупат в реакционната смес, това може да потисне действията на Phusion полимераза. Това се предотвратява чрез третиране на реакционната смес с dUTPase преди добавяне на ензима. Понастоящем устойчив на dUTP вариант на Phusion полимераза, известен като Pfu Turbo, се използва вместо Phusion полимераза като средство за лечение на този проблем.
Какво е Taq полимераза?
Taq ДНК полимераза Изобретението революционизира областта на молекулярната биология. Той реши основен проблем в амплификацията на ДНК. Taq DNA полимераза е ензим, устойчив на топлина, извлечен и изолиран от термофилната бактерия, Thermus aquaticus. Откриването на тези ензими води до развитието на PCR. Този ензим е позволил използването на полимеразна верижна реакция при амплификация на ДНК вместо конвенционални трудоемки техники за клониране. PCR сега се използва в молекулярната диагностика, селскостопански и промишлени области с много нови варианти, добавени към техниката.
Фигура 02: Taq полимераза
Taq ДНК полимераза функционира в оптималния температурен диапазон между 720С - 800В. Taq ДНК полимераза изисква ко-фактор; магнезий за неговата функция. Taq полимераза няма способността за корекция на 3 '- 5', следователно, честотата на грешките на Taq ДНК полимеразата е висока в сравнение с по-новите видове ДНК полимерази като Phusion полимераза и т.н. Но популярността на Taq ДНК полимеразата остава същото в целия свят на науката поради удобството и гъвкавостта на ензима.
Какви са приликите между Phusion и Taq полимераза?
- Както ензимите Phusion и Taq полимераза са полимеризиращи ензими, които са способни да добавят нуклеотиди към 3 'свободния край на веригата на ДНК.
- Както Phusion, така и Taq полимеразите изискват праймерна последователност за иницииране на полимеризация.
- Полимеразите Phusion и Taq са устойчиви на топлина.
- Полимеразите Phusion и Taq се използват в PCR механизми за амплифициране на ДНК.
- При добавяне на полимераза към реакционната смес, Phusion и Taq полимерази се добавят последни, за да се гарантира ефективността на ензима.
- Полимеразите Phusion и Taq са синтезирани в търговската мрежа за експериментални цели с молекулярна биология.
- Както Phusion, така и Taq полимеразите изискват кофактор, за да завърши своята функция.
Каква е разликата между Phusion и Taq полимераза?
Phusion срещу Taq полимераза | |
| Phusion е ДНК полимераза, изолирана от Pyrococcus furiosus и се използва главно в експерименти с клониране за увеличаване на вярността. | Taq ДНК-полимераза е стандартната ДНК-полимераза, използвана в полимеразната верижна реакция (PCR) и е изолирана от термостабилната бактерия, Thermus aquaticus. |
| Източник Организъм | |
| Физията се извлича от екстремофилна архея - Pyrococcus furiosus. | Тези литературни произведения се простират от периода на колонизация до периода на деколонизация. |
| Способност за четене на доказателство | |
| 3 '- 5' доказателствена способност за четене присъства във Phusion. | 3 '- 5' доказателна способност за четене липсва в Taq полимераза. |
| вярност | |
| Висока вярност има с Phusion. | Taq полимераза показва ниска вярност. |
| усилване | |
| Phusion е способен да амплифицира дълги фрагменти от ДНК. | Taq полимераза е способна да амплифицира много по-къси фрагменти на ДНК. |
| dUTP Отравяне | |
| Фюзионното действие се инхибира от нечетно натрупване. | Taq полимеразата не се инхибира от dUPT. |
резюме - Phusion срещу Taq полимеразна
Phusion и Taq ДНК полимераза са две термостабилни полимерази, които се използват в PCR техники. Phusion е полимераза, изолирана от екстремофила, Pyrococcus furiosus като има предвид, че Taq е изолиран от термостабилните бактерии Thermus aquaticus. Откриването на Taq ДНК полимераза води до PCR изобретението. Phusion има много предимства пред Taq, което направи Phusion по-добър вариант при производството на високоякостна ДНК. Въпреки това, Taq полимераза все още се използва като стандартен полимеразен ензим в PCR. Това е разликата между Phusion и Taq полимераза.
справка:
1.Биолаби, Нова Англия. „Taq ДНК полимерази.“ New England Biolabs: Реагенти за индустрията на науките за живота. Налични тук
2. "Phusion ДНК полимераза." New England Biolabs. Налични тук
С любезност на изображенията:
1.'GAM, илюстриран от Nivin Nasri'By NivinN - Собствена работа, (CC BY-SA 4.0) през Commons Wikimedia
2.'Taq'By Adenosine - Собствена работа, (CC BY-SA 3.0) чрез Wikimedia на Commons
