Разлика между обратна фаза и нормална фаза HPLC

Най- ключова разлика между обратна фаза и нормална фаза HPLC е, че обратна фаза HPLC използва полярна неподвижна фаза и по-малко полярна подвижна фаза, докато нормалната фаза HPLC използва неполярна неподвижна фаза и полярна подвижна фаза.

Нормалната фаза HPLC е най-старата техника на HPLC, която Цвет използва при разделянето на растителни екстракти; той използвал креда в стъклена колона. Това беше класическият режим на хроматография, който доведе до назоваването му като "нормална" техника. Обратно-фазовата HPLC, от друга страна, е обратното на нормалната техника, която учените разработиха напоследък.

СЪДЪРЖАНИЕ

1. Преглед и ключова разлика
2. Какво е обратна фаза HPLC
3. Какво е нормална фаза HPLC
4. Паралелно сравнение - Обратна фаза срещу нормална фаза HPLC в таблична форма
5. Резюме

Какво е обратна фаза HPLC?

Обратна фаза HPLC е хроматографска техника, при която използваме хидрофобна стационарна фаза. Сред всички HPLC методи използваме този метод за приблизително 70% поради широката му приложимост и възпроизводимост. Стационарната фаза е неполярна, а подвижната фаза - полярна.

В повечето случаи учените използват водна смес от вода с смесим, полярен органичен разтворител, като ацетонитрил или метанол като подвижна фаза. Следователно, аналитите взаимодействат с неполярната неподвижна фаза.

Какво е нормална фаза HPLC?

Нормална фаза HPLC е хроматографска техника, при която използваме хидрофилна стационарна фаза. Това е традиционният метод на HPLC, въпреки че не го използваме толкова много. Стационарната фаза е полярна, а подвижната фаза - неполярна. По-важното е, че подвижната фаза на тази техника е 100% органична. Това означава, че за това не се използва вода.

Фигура 01: Пробен профил за нормална фаза и HPLC хроматограми в зависимост от полярността на компонентите в аналита.

Обикновено стационарната фаза съдържа силициев диоксид, циано, диол, амино-свързани фази и др. Подвижните фази включват органични разтворители като хексан, етилацетат и др. Тази техника се основава на задържане на разтворители или аналитични молекули върху полярната неподвижна фаза.

Каква е разликата между обратна фаза и нормална фаза HPLC?

Обратна фаза HPLC е хроматографска техника, при която използваме хидрофобна стационарна фаза. Стационарната фаза на тази техника е неполярна. Стационарната фаза е неполярна, докато подвижната фаза е полярна. Освен това учените използват водна смес от вода с смесим, полярен органичен разтворител, като ацетонитрил или метанол като подвижна фаза в HPLC с обратна фаза. Като има предвид, че нормалната фаза HPLC е хроматографска техника, при която използваме хидрофилна неподвижна фаза. Стационарната фаза на тази техника е полярна. Стационарната фаза е полярна, докато подвижната фаза е неполярна. В допълнение към това учените използват органични разтворители като хексан, етилацетат и др. Като подвижна фаза на нормална фаза HPLC. Инфографиката по-долу представя разликата между обратна фаза и нормална фаза HPLC в таблична форма.

Обобщение - Обратна фаза срещу нормална фаза HPLC

Обратна фаза и нормална фаза HPLC техники са две течни хроматографски техники. Разликата между обратна фаза и нормална фаза HPLC е, че HPLC с обратна фаза използва полярна неподвижна фаза и по-малко полярна подвижна фаза, докато нормалната фаза HPLC използва неполярна неподвижна фаза и полярна подвижна фаза.

справка:

1. Води. „Режими за разделяне на HPLC“. HPLC - обяснена високоефективна течна хроматография: води. Налични тук