Разлика между RP HPLC и HIC

Най- ключова разлика между RP HPLC и HIC е това RP HPLC използва по-полярна подвижна фаза и по-малко полярна неподвижна фаза. Докато HIC използва хидрофобна стационарна фаза, която позволява хидрофобните молекули да се прикрепят към него.

Хроматографията е аналитична техника, която помага да се отдели смес от нейните компоненти. Първо, трябва да разтворим пробата, която да бъде отделена в разтвор. Тази смес разтвор-вещество се нарича подвижна фаза. Тогава подвижната фаза се преминава през друг материал, наречен стационарна фаза. Стационарната фаза определя разделянето на компонентите. Разделянето се случва поради разделянето на материал между подвижната и неподвижната фаза.

СЪДЪРЖАНИЕ

1. Преглед и ключова разлика
2. Какво е RP HPLC
3. Какво е HIC
4. Паралелно сравнение - RP HPLC срещу HIC в таблична форма
5. Резюме

Какво е RP HPLC?

Терминът RP HPLC означава Течна хроматография с обратна фаза. Тя включва отделянето на компонентите в смес, според хидрофобността. Хидрофобните компоненти в подвижната фазова връзка свързват с имобилизираните хидрофобни лиганди на неподвижната фаза, докато хидрофилните компоненти се елуират през стационарната фаза, без да се прикрепят към повърхността на стационарната фаза.

Фигура 01: Апарат за HPLC

Освен това, този метод има по-голяма възпроизводимост в сравнение с други хроматографски техники, а също така показва широка приложимост. Затова използваме този метод в лаборатории за над 75% от всички HPLC методи. През повечето време ние използваме водна смес от вода с разбъркващ се полярен органичен разтворител като подвижна фаза. По този начин тя ще осигури прикрепването на хидрофобните компоненти в разтвора към повърхността на стационарната фаза.

Какво е HIC?

Терминът HIC означава Хроматография на хидрофобно взаимодействие. Това е вид обратнофазна HPLC и този метод се използва главно за отделяне на големи биомолекули като протеини. При този метод трябва да използваме водна среда, за да направим пробата от биомолекулата. Това е така, защото органичните разтворители могат да причинят денатуриране на протеините. Освен това тази техника използва взаимодействието между големи молекули с леко хидрофобна повърхност на неподвижната фаза. Освен това трябва да използваме висока концентрация на сол в пробата, защото насърчава протеина да се задържи в опаковката; този процес се нарича осоляване. Понижавайки концентрацията на сол постепенно, можем да накараме биомолекулите да се елуират отделно според хидрофобността им.

Обикновено този метод използва условията, противоположни на йонообменната хроматография. При тази техника първо трябва да преминем буферен разтвор през колоната, за да намалим разтварянето на разтворителя в пробата. Това прави хидрофобните участъци на протеина да се излагат. Въпреки това, когато молекулата е по-хидрофобна, е необходима по-малко сол за насърчаване на свързването. Тук първо се елуират по-малко хидрофобни разтвори и според промяната на концентрацията на сол, последно се елуират повече хидрофобни разтвори..

Каква е разликата между RP HPLC и HIC?

Хроматографията е аналитична техника за разделяне на компонентите в смес. RP HPLC и HIC са две специализирани хроматографски техники. Основната разлика между RP HPLC и HIC е, че RP HPLC използва по-полярна подвижна фаза и по-малко полярна неподвижна фаза, докато HIC използва хидрофобна стационарна фаза, която позволява на хидрофобните молекули да се прикрепят към нея.

По-долу инфографиката обобщава разликата между RP HPLC и HIC.

Обобщение - RP HPLC срещу HIC

Хроматографията е аналитична техника за разделяне на компонентите в смес. RP HPLC и HIC са две специализирани хроматографски техники. Ключовата разлика между RP HPLC и HIC е, че RP HPLC използва по-полярна подвижна фаза и по-малко полярна неподвижна фаза, докато HIC използва хидрофобна стационарна фаза, която позволява на хидрофобните молекули да се прикрепят към нея.

справка:

1. „Режими за разделяне на HPLC“. Води, налични тук.

С любезност на изображенията:

1. „Препаративна HPLC“ от GYassineMrabetTalk & # x2709; Това неуточнено W3C векторно изображение е създадено с Inkscape. - Собствена работа (CC BY 3.0) чрез Wikimedia на Commons