Разлика между теста на Брадфорд и Лоури протеин

Най- ключова разлика между брадфордския и нископротеиновия анализ е това Тестът за протеин от Брадфорд се основава на смяната на абсорбцията на багрилото Coomassie брилянтно син G-250, докато Lowry протеиновият анализ се основава на реакцията на йони на медни йони (Cu +), получени при окисляване на пептидни връзки с реактив Folin-Ciocalteu.

Анализът е аналитична техника, която помага да се характеризират основните функционални компоненти на пробата. Следователно, анализът може да бъде или качествен, или количествен тест. Много области, включително лабораторна медицина, фармакология, биология на околната среда, молекулярна биология, биохимия и имунология, използват този вид анализи рутинно. Брадфордският и лоури протеиновият анализ са два биохимични анализа, които определят концентрацията на протеин в пробен разтвор. И двата анализа използват колориметрични техники, за да осигурят резултати.

СЪДЪРЖАНИЕ

1. Преглед и ключова разлика
2. Какво е тест за протеини в Брадфорд
3. Какво е анализ на ниско съдържание на протеин
4. Прилики между Брадфорд и Лоури анализ на протеини
5. Паралелно сравнение - Брадфорд срещу Лоури протеин анализ в таблична форма
6. Резюме

Какво е тест за протеини в Брадфорд?

Бредфордният протеинов анализ е бърза спектроскопична аналитична процедура за анализ на протеин. Той показва висока точност при измерване на концентрацията на протеин в разтвор. Marion Bradford представи тази процедура през 1976 г. В този анализ общата реакция се основава на аминокиселинния състав на измерените протеини. С други думи, тестът за протеин на Брадфорд е колориметричен анализ. Използва багрилото Coomassie брилянтно синьо. Следователно, този колориметричен протеинов анализ зависи от изменението на абсорбцията на багрилото. Coomassie блестящо синьо G-250 съществува в три формата: катионен (червен), анионен (син) и неутрален (зелен). По време на кисели условия червената форма на багрилото се превръща в синьо. Той потвърждава свързването на протеина. Ако протеинът не присъства, разтворът може да остане в кафяв цвят.

Фигура 01: Бредфордски протеинов анализ

Тестът за протеини в Брадфорд се различава от други протеинови тестове, тъй като е по-малко податлив на смущения на различни химични съединения, присъстващи в протеиновия разтвор. Тези съединения включват натрий, калий, глюкоза и захароза и др.

Какво е ниско протеинов анализ?

Ниско протеиновият анализ е биохимичен анализ, използван за определяне на общото ниво на протеин в разтвор. Oliver H. Lowry е човекът, разработил този реагент през 1940 г. Процедурата изобразява общата концентрация на протеин в разтвора чрез промяна на цвета, пропорционална на концентрацията на протеин в разтвора. Следователно, това е и колориметричен протеинов анализ.

Реакцията между медни йони (Cu +), получена при окисляване на пептидни връзки и реактив Фолин-Циокалтеу, е в основата на тази процедура. Също така, този реагент съдържа фосфомолибдова киселина и фосфор-волфрамова киселина. Реакционният механизъм на протеина на Lowry анализ обаче не е добре разбран. Но това включва окисляването на остатъците от цистеин, триптофан и тирозин чрез намаляване на реактива Фолин-Циокалтеу.

Фигура 02: Тест за ниско съдържание на протеин

Цистеиновите остатъци допринасят за абсорбцията, наблюдавана при теста за Lowry протеин и реакцията води до блестяща синя молекула; хетерополно молибденово синьо. Редукцията на тази молекула се измерва чрез абсорбция при 660nm. Следователно концентрацията на остатъци от цистеин и триптофан, които намаляват реактива Folin-Ciocalteu, извежда общата концентрация на протеина в разтвора.

Какви са приликите между Bradford и Lowry Protein Test?

• Пробите за протеини в Брадфорд и Лоури определят концентрацията на протеин в разтвор.
• И двата метода са колоуриметрични методи.
• Също така чувствителността на двата метода е висока.

Каква е разликата между Брадфорд и Лоури анализ на протеини?

Брадфордският и лоури протеиновият анализ са два вида анализи, които определят концентрацията на протеин в разтвор. Тестът за протеин в Брадфорд разчита на смяната на абсорбцията на багрилото Coomassie брилянтно син G-250, докато анализът на протеин Lowry зависи от реакцията на медни йони, получена при окисляване на пептидни връзки, с реагент Folin-Ciocalteu. И така, това е ключовата разлика между теста за протеини от Брадфорд и Лоури. Тестът за протеин на Брадфорд отнема 15 минути за получаване на резултат, докато анализът на протеина на Lowy отнема 40-60 минути, за да даде резултат. По този начин, това е още една разлика между теста за протеини от Брадфорд и Лоури. Освен това, анализът на протеина на Брадфорд зависи от състава на аминокиселината, докато анализът на протеин Lowry е частично зависим от състава на аминокиселините. Следователно, това също е разлика между теста за протеини на Брадфорд и Лоури.

По-долу inforaphic предоставя повече подробности за разликата между теста на Брадфорд и Lowry протеин.

Обобщение - Брадфорд срещу Lowry протеин анализ

Анализът е аналитична техника, използвана за характеризиране на основния функционален компонент на пробата. Брадфордският и лоури протеиновият анализ са два вида протеинови анализи, които функционират при колориметрични техники. И Брадфордският, и Лори протеиновият анализ определят концентрацията на протеин в разтвор. Ключовата разлика между Bradford и Lowry Protein Assay се състои в колориметричната техника, която използват. Тестът за протеини в Брадфорд използва блестящо синьото G-250 на Coomassie, докато Lowry протеиновият анализ използва медни йони (Cu +) йони и реактив Folin-Ciocalteu. Освен това методът на Брадфорд дава по-бързи резултати от теста за протеин Lowry. И двата метода обаче са силно чувствителни методи и са обект на смущения от различни вещества.

справка:

1. „Канадско списание за ботаника“. Canadian Journal of Botany - 60 (7): 1046 - PDF, достъпен тук.
2. "Химия на протеиновите анализи." Thermo Fisher Scientific - САЩ, наличен тук.

С любезност на изображенията:

1. „Брадфордски протеинов анализ“ от Helito - Собствена работа (CC BY-SA 4.0) през Commons Wikimedia