Разлика между RT-PCR и QPCR

Полимеразна верижна реакция с обратна транскрипция (RT-PCR)

RT-PCR срещу QPCR

Напредъкът в биотехнологиите доведе до откриването на няколко начина за справяне с изискванията за трансплантация на органи през годините. Преди човек, който доброволно ще дари всеки орган веднага след смъртта на нуждаещ се пациент, можеше само да започне операцията за трансплантации. Непрекъснатите изследвания и изследвания на биолозите водят до откриването на стволови клетки.

Стволовите клетки се отнасят за тези, които са взети от ДНК на ембрион, които ще служат като източник за регенерацията на клетките, които по същество биха били клон на органа, в който е получена ДНК. Въпреки че правозащитниците лобират за спиране на подобни процедури, успешните операции наистина са доказали ефективността на развитието на стволови клетки при трансплантация на органи.

Преди да може човек да оцени и разбере напълно стволовите клетки, обаче, е необходимо да се запознае с различните терминологии, свързани с това научно откритие. Отглеждането на стволови клетки се занимава с ДНК и нейното кодиране. По този начин за студентите или за хората, които се интересуват от тази област, е жизненоважно да правят разлика между RT-PCR и qPCR.

Полимеразната верижна реакция на обратната транскрипция (RT-PCR) е един от многото варианти на верижната реакция на полимеразата или PCR. Тази лабораторна техника е широко използвана в молекулярната биология, за да могат учените да произведат множество копия на определена последователност на ДНК чрез процес, създаден като „амплификация“. Разликата между RT-PCR и традиционния PCR е, че първо РНК се транскрибира обратно в своя ДНК комплемент, който използва обратната транскриптаза. След това новата допълваща ДНК, съдържаща обърната транскрипция, ще бъде амплифицирана с помощта на традиционния PCR или PCR в реално време..

Повечето студенти, изучаващи този процес, често правят грешката при смяна на PCR на обратната транскрипция и PCR в реално време, тъй като двете се съкращават по подобен начин. За да избегнат объркване, биолозите етикетират PCR в реално време като количествен PCR в реално време или qPCR.

QPCR се различава значително от RT-PCR, тъй като qPCR е отговорен за измерването на усилването, тъй като се случва. Може да се каже, че RT-PCR стартира процеса на амплификация, докато qPCR го измерва, докато се извършва процедурата.

Количествен PCR в реално време

QPCR всъщност е революционизирал традиционния метод за еднопосочен подход, когато става въпрос за количествено определяне на ДНК и РНК, тъй като прилагането на метода qPCR дава възможност на биолозите да определят началната концентрация на нуклеиновата киселина, дори преди резултатите от реакцията да бъдат наблюдавани и надолу.

Приложението на qPCR, който сега се счита за най-мощната и чувствителна техника за анализ на генетичните изследвания, се разшири значително. В момента участва в количествен анализ на генната експресия, генотипиране, откриване на патогени и анализ на SNP, заедно с измервания на РНК интерференция.

QPCR често се комбинира с процеса на обратна транскрипция за количествено определяне на месинджърната РНК и MicroRNA, присъстваща в клетките на тъканите, наблюдавани и експериментирани. Това дава още една видима разлика между двете: RT-PCR може да се използва за процеса на амплификация, но трябва да се слее с qPCR за целите на количественото определяне.

Известно е също, че QPCR е по-количествен, тъй като данните могат да се събират, докато фазата на експоненциален растеж (log) на PCR напредва. Биолозите отбелязват, че количеството на страничния продукт на PCR е пряко пропорционално на количеството на нуклеиновата киселина на шаблона, което ще бъде измерено чрез qPCR.

От друга страна, RT-PCR далеч не е с количествен характер, тъй като спазването на интензивността на усилената лента върху гел, следвайки зададения стандарт за концентрация, може да доведе до полу-количествено заключение.

Резюме:

1.QPCR и RT-PCR са и двата термина, използвани в биотехнологиите и използвани за производството на множество копия на ДНК.
2.RT-PCR се използва за усилване на обърната транскрипция на ДНК кода; QPCR измерва усилването.
3.RT-PCR е за амплификация, докато qPCR е за количествено определяне.
4.QPCR има количествен характер, докато RT-PCR не е.