Разлика между конкурентната и неконкурентната ELISA

Най- ключова разлика между конкурентен и неконкурентен ELISA е това конкурентната ELISA използва инхибиторен антиген, докато неконкурентен ELISA не използва инхибиторен антиген за анализа.

Имуносорбентен анализ (ELISA), свързан с ензима, е имунологичен анализ, който открива различни мишени като антитела, антигени, протеини и гликопротеини. Това е бърз и прост метод за изпълнение. Следователно по-често се използва за изследователски и диагностични цели. ELISA включва използването на ензими и специфичното свързване на антитялото и антигена. Въз основа на това как протичат реакциите, има четири типа ELISA: директен ELISA, индиректен ELISA, сандвич ELISA и инхибиращ ELISA. Директният, индиректен и сандвич ELISA са видове неконкурентен ELISA, докато инхибирането ELISA е вид допълващ ELISA. Основната цел на тази статия е да обсъди разликата между конкурентна и неконкурентна ELISA.

СЪДЪРЖАНИЕ

1. Преглед и ключова разлика
2. Какво е конкурентен ELISA
3. Какво е неконкурентен ELISA
4. Прилики между конкурентен и неконкурентен ELISA
5. Паралелно сравнение - конкурентни срещу неконкурентни ELISA в таблична форма
6. Резюме

Какво е конкурентен ELISA?

Конкурентната ELISA измерва концентрацията на антиген в пробата чрез откриване на сигнални смущения. Тук анализът използва инхибиторен антиген. Следователно, това е вид инхибиране ELISA. По време на тази процедура антигените, присъстващи в пробата, се конкурират с избрания референтен антиген за свързване със специфично количество белязано антитяло. Освен това, тази процедура започва с инкубиране на пробата, с излишното количество белязано антитяло. Също така, референтният антиген трябва да бъде предварително покрит върху многократна ямка за анализ. След това пробната смес трябва да се добави към тестовата плака, която съдържа референтния антиген. Свободните антитела ще се свързват с референтния антиген в зависимост от количеството антиген в пробата. Следователно, ако има повече пробен антиген, ще бъде открит по-малко референтен антиген. Така той създава по-слаб сигнал.

Фигура 01: ELISA

За разлика от това, когато пробата съдържа по-малко количество антиген, все повече и повече референтен антиген ще заеме антителата и ще даде силен сигнал. Тъй като конкурентната ELISA дава по-силен сигнал, когато пробата съдържа ниско количество антигени, конкурентната ELISA е много чувствителен анализ, дори за проби с малък брой антигени.

В някои конкурентни ELISA комплекти се използва белязан антиген вместо белязано антитяло. Тук белязаният антиген и пробният антиген ще се състезават за свързване с първичното антитяло. По същия начин, когато количеството антиген в пробата е ниско, количеството белязан антиген, който се свързва с антитела, ще бъде по-голямо и ще създаде по-силен сигнал.

Какво е неконкурентен ELISA?

Сред четирите вида ELISA три вида са неконкурентоспособни ELISA. Те са директен ELISA, индиректен ELISA и сандвич ELISA. И трите формата работят по общия принцип на ELISA с малки разлики в техните методологии.

Директният ELISA използва първично антитяло, белязано с ензим. Следователно, тя не изисква вторично антитяло. Следователно, директната ELISA е по-бърза от другите видове ELISA. Първичното антитяло директно ще се свърже с имобилизирания прицелен антиген, който присъства в плаката. Следователно реакцията на ензим-субстрат ще се проведе, произвеждайки видим сигнал.

Фигура 02: Сандвич ELISA

За разлика от директния ELISA, индиректният ELISA използва незабелязано първично антитяло и ензим, белязано вторично антитяло. След като първичното антитяло се свърже с имобилизирания антиген, вторичното антитяло се свързва с първичното антитяло. Ензимът във вторичното антитяло ще реагира с антигена и ще произведе видим сигнал. Сандвич ELISA е различен както за директен, така и за косвен ELISA. Тук антитялото се обездвижва към стената на изследваната плака.

Какви са приликите между конкурентната и неконкурентната ELISA?

• Конкурентният и неконкурентен ELISA са два вида техники за имуносорбентен анализ.
• Те са изключително гъвкави и чувствителни техники.
• Освен това, конкурентният и неконкурентен ELISA са свързани с ензимите имуноанализи.
• Също така и двата метода генерират сигнал поради ензимно-субстратна реакция.

Каква е разликата между конкурентната и неконкурентната ELISA?

Конкурентната ELISA е вид ELISA, който разчита на попълването между анализирания антиген и белязания антиген за ограничено количество специфично антитяло. От друга страна, не съществува такава конкуренция между интересуващия антиген и референтния антиген при неконкурентен ELISA. По този начин, това е ключовата разлика между конкурентната и неконкурентната ELISA. По подобен начин конкурентната ELISA е инхибиторна ELISA, докато неконкурентната ELISA не е инхибиторна ELISA. Така че това също е разлика между конкурентната и неконкурентната ELISA.

Освен това конкурентната ELISA е по-подходяща за измерване на ниско количество антиген, който представлява интерес. Това е чувствителен метод. От друга страна, неконкурентната ELISA не зависи от броя на антигените, присъстващи в пробата. Следователно това също е разлика между конкурентната и неконкурентната ELISA.

По-долу инфографиката обяснява разликата между конкурентната и неконкурентната ELISA.

Обобщение - Конкурентен и неконкурентен ELISA

Конкурентният и неконкурентен ELISA са двата основни типа ELISA или свързани с ензима имуносорбентни анализи. Обобщавайки разликата между конкурентна и неконкурентна ELISA, конкурентната ELISA разчита на конкуренцията между интересуващия антиген и референтния антиген към ограниченото количество антитела. Следователно конкурентната ELISA е наречена също като инхибираща ELISA. От друга страна, неконкурентната ELISA не разчита на конкуренцията между целевите антигени и референтните антигени. Той използва излишък от белязано специфично антитяло спрямо аналита, който представлява интерес. По този начин, това е ключовата разлика между конкурентната и неконкурентната ELISA. Директният ELISA, индиректният ELISA и сандвич ELISA са трите основни типа неконкурентен ELISA.

справка:

1. Био-Рад. „Видове ELISA | Bio-Rad. " Био, налични тук.
2. "Четири вида ELISA." Cusabio Life Science - Вашият партньор по биология, достъпен тук.

С любезност на изображенията:

“Elisa tipus” от Carolfv333 - Собствена работа (CC BY-SA 4.0) Commons Wikimedia.
„Сандвич Имуноанализ, ELISA“ От NickCT - Собствена работа (CC BY-SA 3.0) през Commons Wikimedia